显微切割结合RNA线性扩增技术的应用

作     者：韩为农 李虹 王爽 周文 姚开泰 

作者机构：中南大学湘雅医学院肿瘤研究所教育部重点实验室湖南长沙410078 中国人民解放军第一军医大学病理教研室广东广州510515 

出 版 物：《癌症》 (Chinese Journal of Cancer)

年 卷 期：2002年第21卷第9期

页      面：1022-1025页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金重点项目(39730200) 美国中华医学会基金项目(96-655) 

主　　题：显微切割 RNA线性扩增 RT-PCR方法 鼻咽肿瘤 

摘      要：背景与目的:当对无间质细胞混杂的肿瘤细胞进行选择性分析时,显微切割技术是不可缺少的,然而,从显微切割所得的细胞中获取足够RNA量相当困难。本文的目的是寻找一特异方法,将鼻咽癌细胞从肿瘤间质细胞中分离出来,并对其扩增,以备进一步研究。方法:采用显微切割技术从鼻咽癌组织冰冻切片中获取鼻咽癌细胞,提取RNA并对微量RNA进行体外转录,然后,用RT-PCR分别验证扩增RNA的β-actin和GADPH基因表达水平。结果:从鼻咽癌组织中获取了20000～40000个细胞,抽提RNA,扩增后获得了片断大小为0.5～2.5kb的RNA,在β-actin、GADPH表达完整。结论:显微切割结合RNA线性扩增技术能成功地获取较为单一的鼻咽癌细胞,扩增后的RNA完整性较好,能运用于进一步研究中。