可用于植物转化的RNAi载体构建方法

作     者：娄玲玲 郑唐春 曲冠证 李开隆 LOU Ling-ling;ZHENG Tang-chun;QU Guan-zheng;LI Kai-long

作者机构：东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 

出 版 物：《安徽农业大学学报》 (Journal of Anhui Agricultural University)

年 卷 期：2012年第39卷第1期

页      面：120-123页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(30972389)资助 

主　　题：RNAi 转基因 烟草 

摘      要：利用PCR方法扩增杨树Poptr;CYCD1;1基因的一段内含子序列,并克隆到pROKⅡ载体中,以构建可用于植物特定基因表达干扰的RNAi载体。为了验证载体的效果,构建pCAMBIA-1303载体转化烟草,经检测,转基因烟草能过量表达外源GUS与GFP融合蛋白。把GUS及GFP片段序列连接于RNAi载体,并导入pCAMBIA-1303载体转化烟草。试验结果表明,GUS及GFP干扰序列的导入均能大大降低外源GUS与GFP融合基因的表达。结果说明构建的载体能有效干扰特定基因的表达。