多重PCR检测病死鸡中沙门氏菌方法的研究

作     者：杨帆 王红宁 张安云 雷昌伟 张志坤 

作者机构：四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室、生物资源与生态环境教育部重点实验室、“985工程”西南资源环境与灾害防治科技创新平台成都610064 

出 版 物：《四川大学学报（自然科学版）》 (Journal of Sichuan University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2015年第52卷第1期

页      面：163-169页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家基础研究计划973项目(2013CB127200) 国家公益性行业(农业)科研专项经费项目(201303044),(201403054) 国家“现代农业产业技术体系建设专项资金”项目(CARS-41-K09) 四川省公益性科研专项(2013NZ0025) 四川省蛋鸡产业链项目(2011NZ0073) 四川省肉鸡产业链项目(2012NZ0037) 

主　　题：多重PCR 沙门氏菌 鸡白痢沙门氏菌 肠炎沙门氏菌 

摘      要：为了建立能够同时检测病死鸡样品中的沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的多重PCR方法.采用煮沸法提取DNA做为模板,选择分别针对沙门氏菌属、鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌的特异性基因(invA、fliC、sdfⅠ)设计引物,优化反应体系和反应参数,建立多重PCR检测方法.应用该方法对国内17家鸡场369份病死鸡样品进行沙门氏菌的检测,检测结果与传统细菌培养法的结果进行比较.结果表明,优化过的多重PCR可同时对沙门氏菌种、属进行鉴定,灵敏度为4.6×102 CFU/mL;多重PCR方法共检测出沙门氏菌34株,其中鸡白痢沙门氏菌21株、肠炎沙门氏菌5株,与传统细菌培养法检测结果的符合率分别为91.2%、90.5%和80.0%.