信号肽疏水性的提高促进青霉素G酰化酶分泌

作     者：杨运桂 徐京宁 胡泰山 钱友存 杨胜利 龚毅 YANG Yun Gui 1, XU Jing Ning 2, HU Tai Shan 1, QIAN You Cun 1, YANG Sheng Li 1, GONG Yi 1* ( 1 Shanghai Research Center of Biotechnology, Institute of Biological Science, Chinese Academy of Sciences and Shanghai Center of Life

作者机构：中国科学院上海生命科学研究院上海生物工程研究中心!上海200233 华东理工大学国家生物反应器工程重点实验室!上海200237 中国科学院上海生命科学? 

出 版 物：《生物化学与生物物理学报》 (ACTA BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA SINICA)

年 卷 期：2000年第32卷第2期

页      面：163-168页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：国家“8 6 3”生物技术资助项目!No .10 2 11 0 2 0 1&& 

主　　题：青霉素G酰化酶 信号肽 疏水核心 疏水性 

摘      要：设计和合成了一段具有连续 10个亮氨酸强疏水核心的信号肽 (artificialsignalpeptide ,ASP) ,由EcoRI KpnI位点融合到青霉素G酰化酶 ( penicillinGacylase ,PAC)信号肽 (wildtypesignalpeptide,WTSP)的 - 4Pro位点 ,分别构建了PAC表达质粒 :pKKpacΔSP ,pKKpacWTSP ,pKKpacASP ,pETpacWTSP ,pETpacASP。ASP与WTSP均为 2 6个氨基酸 ,两者N端为MK ,C端均为PAVA。通过酶活性的测定及Western印迹分析 ,分别在tac,T7及氧调控表达系统中研究ASP和WTSP对PAC分泌的影响。结果表明 ,与WTSP相比 ,ASP对PAC酶活水平平均提高了约 63 % ,对PAC前体的分泌能力平均提高了约 4 1% ,通过提高信号肽疏水核心疏水性有效促进了青霉素G酰化酶的分泌。