Exendin-4类似物的克隆、表达与体内生物活性检测

作     者：李泰明 谷春娇 葛晓宇 李哲哲 王丹 马艳红 刘涛 张美由 李丽 刘景晶 Taiming Li;Chunjiao Gu;Xiaoyu Ge;Zhezhe Li;Dan Wang;Yanhong Ma;Tao Liu;Meiyou Zhang;Li Li;Jingjing Liu

作者机构：中国药科大学天然药物活性组分与药效国家重点实验室江苏南京210009 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2012年第28卷第7期

页      面：877-886页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2202AA217031-2) 国家自然科学基金(No.30270298) 江苏省自然科学基金(Nos.BK95092309 BG2001011) 国家基础科学人才培养基金(No.J0630858)资助 

主　　题：Exendin-4类似物 生物活性 血糖 胰岛素 

摘      要：为研究Exendin-4类似物的克隆,融合表达及在体内的生物活性,在pED载体融合伴侣序列中插入利于下游分离纯化的序列成为5#载体,将Exendin-4类似物基因与5#载体中的融合伴侣基因通过酸水解位点连接,转化至*** BL21中并诱导表达融合蛋白,酸水解将目的肽与融合伴侣分开后,经阴离子交换树脂分离得到目的肽。6周～8周正常雄性ICR小鼠皮下注射Exendin-4类似物后,口服糖耐量实验检测在不同时间段小鼠血液中葡萄糖及胰岛素含量的变化。结果表明:融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%,Exendin-4类似物纯度达91.8%。Exendin-4类似物的活性与对照组相比,具有显著的降低血糖和显著促进胰岛素分泌的活性(P0.01)。