脐带间充质干细胞对角膜内皮细胞增殖能力的影响

作     者：丁姗姗 吴静 孙国栋 侯光辉 陈剑 徐锦堂 DING Shan-shan;WU Jing;SUN Guo-dong;HOU Guang-hui;CHEN Jian;XU Jin-tang

作者机构：暨南大学附属第一医院眼科广州市510632 暨南大学医学院眼科研究室广州市510632 暨南大学附属第一医院骨科广州市510632 广东省珠海市人民医院眼科519000 

出 版 物：《实用医学杂志》 (The Journal of Practical Medicine)

年 卷 期：2011年第27卷第1期

页      面：7-10页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(编号:30872808) 珠海市科技计划项目(编号:PB20051014) 暨南大学侨办重点学科基金资助项目(编号:51205004) 

主　　题：间质干细胞 角膜内皮细胞 共培养 细胞增殖 

摘      要：目的:探讨并优化人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)体外获取及培养增殖的方法并鉴定;观察兔角膜内皮细胞(cornea endothelial cells,CEC)与hUCMSCs共培养后增殖能力及细胞周期的变化。方法:用酶消化法体外分离培养hUCMSCs,流式细胞仪检测hUCMSCs免疫表型;将CEC分别与hUCMSCs、兔角膜基质细胞在Transwell体系中共培养,通过流式细胞术观察内皮细胞增殖能力及细胞周期的变化。结果:采用酶消化法能有效分离纯化hUCMSCs。接种24h,贴壁细胞形态多为长梭形、多边形或成纤维细胞样形态,大小均一。流式细胞仪分析第3代细胞均表达CD29、CD44、CD105,不表达造血干细胞标记CD34、CD45和HLA-DR。与空白对照组CEC周期比较脐带间充质干细胞组与基质细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例增加,G1期细胞比例下降,干细胞组增加幅度高于基质细胞组。干细胞组角膜内皮细胞S期细胞比例比空白对照组的平均增加近17%,增殖能力显著提高。结论:经鉴定用酶消化法体外能成功分离培养出hUCMSCs,将其与CEC共培养能促进CEC增殖。