鼠伤寒沙门菌pagC启动子的克隆与活性分析

作     者：王宏卫 赵平 张珉 朱诗应 戚中田 Wang Hongwei Zhao Ping Zhang Min Zhu Shiying Qi Zhongtian * (Department of Microbiology, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China)

作者机构：第二军医大学微生物学教研室上海200433 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2003年第43卷第3期

页      面：308-314页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目 ( 30 1 70 5 1 4 ) 

主　　题：鼠伤寒沙门菌 pagC启动子 克隆 活性 镁离子 庚型肝炎病毒 表达质粒 

摘      要：从鼠伤寒沙门菌中克隆出pagC启动子 (PpagC) ,构建体内激活的表达质粒pZW ,插入庚型肝炎病毒 (HGV)NS3基因 ,构建出表达质粒pZWNS3。以其转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,观察PpagC 的启动活性。结果表明 :Mg2 +可抑制PpagC 的启动活性 ,Mg2 +浓度小于50mmol L时培养的重组菌经SDS PAGE和Westernblot检测能高水平表达HGVNS3蛋白。Mg2 +浓度升至 50mmol L时 ,NS3蛋白表达量明显降低。收集以 50mmol LMg2 +的培养基扩增的重组菌 ,灌胃接种C57小鼠 ,检测小鼠的血清抗体、T细胞增殖和CTL反应。结果显示PpagC是一个强的宿主体内激活的启动子 ,为构建以伤寒沙门氏菌为载体的高效免疫口服疫苗提供了一个新的途径。