克隆牛过程中电融合条件对附植前胚胎发育的影响

作     者：张利生 毕春明 李劲松 吴昱琪 寇朝辉 姜岩 蒋满喜 吕自力 王小宁 孙青原 陈大元 

作者机构：中国科学院动物学研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室北京100080 新疆金牛生物股份有限公司生物科学研究院乌鲁木齐830026 

出 版 物：《自然科学进展》 (自然科学进展)

年 卷 期：2004年第14卷第5期

页      面：581-584页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(批准号:39830280) 新疆金牛生物股份有限公司资助项目 

主　　题：克隆牛 电融合 胚胎发育 核移植 卵母细胞 

摘      要：实验比较了克隆牛过程中电融合条件的改善对附殖前胚胎发育的影响.电融合强度为140V/mm,10μs/次对的效率要较100V/mm,20μs/次和180V/mm,10μs/次时高,可以降低融合后重构胚死亡率,提高克隆牛囊胚发育率.施加直流电脉冲前先给予5V交流电场预处理数秒钟,然后在电极之间通以两个直流脉冲(140 V/mm,10μs/次,间隔0.1 s)与不用交流电预处理对融合率和重构胚的发育率无显著差异.另外实验比较了甘露醇和山梨醇两种融合液对融合及重构胚发育的影响,结果表明囊胚发育率差异不显著,但山梨醇较甘露醇融合液更容易操作.实验生出的4头克隆牛存活至今.