大鼠胰岛的分离和纯化

作     者：侯凌 尹注增 向莹 李俊华 陈实 陈刚 罗小平 

作者机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所教育部/卫生部重点实验室武汉430030 

出 版 物：《华中科技大学学报（医学版）》 (Acta Medicinae Universitatis Scientiae et Technologiae Huazhong)

年 卷 期：2009年第38卷第3期

页      面：413-416页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：国家"十一五"科技支撑计划项目(No.2006BAI05A07) 国家重点基础研究发展计划项目(No.2005CB522500) 

主　　题：大鼠胰岛 分离 纯化 

摘      要：目的探讨获得足够数量和较高纯度大鼠胰岛的分离和纯化方法。方法采用Ⅴ型胶原酶灌注消化法分离成年大鼠胰岛,Ficoll400非连续密度梯度法纯化胰岛。双硫腙(DTZ)染色鉴定培养的胰岛细胞,锥虫蓝染色检测细胞活性。葡萄糖刺激胰岛素释放试验评价胰岛细胞的功能。结果分离纯化后大鼠胰岛平均收获量为(480±30)IEQ,纯度大于90%,活性大于90%。在低糖和高糖刺激下,胰岛素分泌量分别为(12.28±0.89)mIU/L、(19.01±1.49)mIU/L,二者相比较,差异有统计学意义(P0.05),刺激指数为(1.55±0.01)。结论胶原酶Ⅴ逆行灌注消化胰腺和Ficoll400非连续密度梯度纯化法,可获得高纯度高活率的大鼠胰岛。