转化生长因子β1的小干扰RNA对肝纤维化大鼠Smad蛋白表达的影响

作     者：孙银春 郎清 钱克莉 肖朗 刘杞 石小枫 SUN Yin-chun;QIAN Ke-li;XIAO Lang;LIU Qi;SHI Xiao-feng

作者机构：重庆医科大学附属第二医院感染科重庆医科大学病毒性肝炎研究所教育部感染性疾病分子生物学重点实验室400010 四川省达州市中心医院感染科 

出 版 物：《中华肝脏病杂志》 (Chinese Journal of Hepatology)

年 卷 期：2012年第20卷第4期

页      面：289-293页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30671867) 

主　　题：肝硬化 转化生长因子β Smad 

摘      要：目的研究转化生长因子（TGF）β1的小干扰RNA（siRNA）对CCl4诱导肝纤维化大鼠TGFβ1／Smad信号通路的影响。方法以前期研究的TGFβ siRNA治疗前后肝纤维化大鼠肝脏组织作为研究对象，分为正常组，模型组、TGFβ1 siRNA0．125mg／kg组、TGFβ1 siRNA0．25mg／kg组和阴性对照组（0．25mg／kg非特异性靶序列）。用免疫组织化学和Western blot检测Smad2、3、4、7的蛋白表达；Real-time PCR法检测Smad2、3、4、7的mRNA表达。多组间数据比较用方差分析，两两比较采用q检验。结果免疫组织化学结果显示TGF-β siRNA0．25mg／kg组及0．125mg／kg组Smad2／3、4的蛋白表达量较模型组、阴性对照组明显减少（F值分别为115．538，117．178，P〈0．01），TGFβ1 siRNA 25mg／kg组表达量较0．125mg／kg组少（P〈0．05）。TGFβ1 siNA0．25mg／kg组及0．125mg／kg组Smad7的蛋白表达量较模型组、阴性对照组增加（F=125．34，P〈0．01），TGFβ1 siRNA0．25mg／kg组表达量较0．125mg／kg组多（P〈0．05）。Western blot结果与之相似。Real-time PCR结果显示，与模型组和阴性对照组比较，TGFβ1 siRNA可以明显抑制Smad2、3、4基因的表达，且TGFβ1 siRNA0．25mg／kg组Smad2、3、4的mRNA表达量（相对表达量分别为2．870±0．705、2．904±0．414、2．667±0．466）较TGFβ1积NA0．125mg／kg组（相对表达量分别为5．998±0．329、5．827±0．781、5．102±0．102）明显减少（P〈0．05）。TGFβ1 siRNA0．25mg／kg组及0．125rng／kg组Smad7的mRNA表达量较模型组、阴性对照组增加（F=29．615，P〈0．01），TGFβ1 siRNA0．25mg／kg组表达量较0．125mg／kg组多（P〈0．05）。结论TGFβ1 siRNA干扰大鼠TGFβ1表达后，Smad2、3、4表达量明显降低，而Smad7表达仍维持在较高水平，这利于肝纤维化的改善。