罗氏沼虾MSG蛋白对精子明胶水解活性影响的功能

作     者：杨帆 钱叶青 马文明 李晔 杨劲树 杨卫军 

作者机构：濒危野生动物保护遗传与繁殖教育部重点实验室浙江大学生命科学学院杭州310058 浙江大学舟山海洋研究中心舟山316021 应用海洋生物技术教育部重点实验室宁波大学生命科学与生物工程学院宁波315211 

出 版 物：《科学通报》 (Chinese Science Bulletin)

年 卷 期：2013年第58卷第16期

页      面：1492-1497页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(2010CB833803) 国家自然科学基金(40730212 30901093) 浙江省海洋生物技术产业科技创新团队基金(2010R50029 2012R10029-14)资助 

主　　题：受精 RNAi 精子蛋白水解酶 雄性生殖系统 

摘      要：雄性生殖系统中的蛋白酶被认为在生殖过程中起着十分关键的作用.不同于哺乳动物生殖系统的蛋白酶,甲壳类精子酶类的研究相对较少.在先前的研究中,我们鉴定了一种新型的罗氏沼虾精子明胶酶(MSG),发现它可以特意地被MRPINK抑制.然而,MSG参与到生殖过程的功能仍未阐明.本研究Western blotting的结果显示,MSG蛋白分布在雄性生殖系统的输精管和壶腹中,在精巢中没有分布;免疫组化和免疫荧光技术结果表明,MSG只分布在输精管和壶腹的内壁表皮细胞核精子的基部.为进一步研究MSG在罗氏沼虾体内的生理功能,采用RNA干涉的方法使MSG基因沉默,通过半定量PCR和Western blotting检测发现,干涉后个体内MSG核酸水平和蛋白水平与对照组相比均下降了80%以上.利用明胶SDS-PAGE和明胶薄层分析方法发现,干涉后精子的蛋白水解活力明显降低.以上结果表明,MSG在罗氏沼虾精子的水解蛋白活性方面起着重要作用.