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内蒙古自治区呼和浩特市赛罕区大学西街235号 邮编: 010021
作者机构:西南大学荣昌校区动物医学系重庆荣昌402460 中国人民解放军第三军医大学基础部实验动物学教研室重庆沙坪坝400038
出 版 物:《中国兽医杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Medicine)
年 卷 期:2013年第49卷第5期
页 面:19-22页
基 金:国家自然科学基金(31000546) 国家转基因生物新品种培育科技重大专项课题(2011ZX08009-003-006)
主 题:巴马香猪 类固醇激素急性调节蛋白 真核表达载体 表达鉴定
摘 要:本试验通过RT-PCR扩增巴马香猪StAR基因,分析其序列的结构特点并构建真核表达载体,为StAR基因在猪睾丸间质细胞中的超量表达研究奠定基础。根据NCBI中猪StAR基因序列设计并合成引物,以巴马香猪睾丸组织总RNA为模板进行RT-PCR,将所得目的基因与pEGFP-C1进行双酶切后连接构建真核表达载体pEGFP-C1-StAR。结果显示,连接到pSURE-T克隆载体上的目的片段测序结果为858碱基组成,编码含有285个氨基酸残基的蛋白质,与NCBI报道的StAR基因比对,核酸同源性在99.3%以上,并成功构建了重组载体pEGFP-C1-StAR。