关岭黄牛MSTN启动子真核报告载体的构建与启动活性研究

作     者：刘敏 许厚强 陈伟 陈祥 李飞 LIU Min;XU Hou-qiang;CHEN Wei;CHEN Xiang;LI Fei

作者机构：贵州大学生命科学学院贵州贵阳550025 贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室贵州贵阳550025 

出 版 物：《广东农业科学》 (Guangdong Agricultural Sciences)

年 卷 期：2013年第40卷第17期

页      面：133-136页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2011ZX08009-004) 贵州省科技厅农业攻关项目(黔科NY字3008号) 贵州大学研究生创新基金(校农科2012007) 

主　　题：MSTN基因 启动子 荧光素酶 C2C12 3T3-L1 

摘      要：采用PCR技术扩增牛MSTN基因启子,亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,构建重组报告载体pGL3-BasicMSTN-promoter。将重组报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter与内参质粒pRL-TK用脂质体法瞬时共转染小鼠成肌细胞系C2C12和小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1,通过双荧光素酶活性检测其启动子活性。测序结果表明,成功构建了牛MSTN基因真核报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter,瞬时转染试验表明,pGL3-Basic-MSTN-promoter在C2C12细胞和3T3-L1细胞中的启动子活性分别为pGL3-Basic空载体的14.53倍、5.02倍。研究结果为进一步研究MSTN基因的表达调控机制奠定了基础。