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原代乳鼠心肌细胞培养方法的改进

An improved protocol for primary culture of cardiomyocyte from neonatal rat

作     者:陶静 马依彤 李晓梅 杨毅宁 马翔 陈邦党 刘芬 陈小翠 盖敏涛 Tao Jing;Ma Yitong;Li Xiaomei;Chen Bangdang;Yang Yining;Ma Xiang;Liu Fen;Chen Xiaocui;Gai Mintao

作者机构:新疆医科大学第一附属医院心脏中心乌鲁木齐830054 新疆心血管病研究所重点实验室 

出 版 物:《中华心血管病杂志》 (Chinese Journal of Cardiology)

年 卷 期:2014年第42卷第1期

页      面:53-56页

核心收录:

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金一地区科学基金项目(81060025,81060021) 教育部高等学校博士学科专项科研基金项目(20106517110002) 973计划前期研究专项(2010CB535013) 新疆研究生科研创新项目(XJGR2013086) 

主  题:肌细胞 心脏 细胞培养技术 

摘      要:目的通过对传统乳鼠心肌细胞体外培养的条件、方法进行改进,得到纯度高、活力好、结构功能完整的心肌细胞。方法改进心室肌组织剪切方法,分别用胰酶、Ⅱ型胶原酶依次消化分离心肌组织,严格要求所需溶液pH值,差速贴壁法和化学抑制法相结合纯化心肌细胞。结果心肌细胞12h后开始贴壁生长,24h出现单个细胞自发性搏动,48h部分心肌细胞间形成交联,72h心肌细胞黏合成簇,96h后细胞伪足相互接触交织成密集的网,形成放射状排列的细胞簇,可见岛屿样搏动。细胞存活率、纯度均达98%以上。结论此种方法培养的心肌细胞纯度高、活力好、结构及功能完整,是一种可靠的原代乳鼠心肌细胞培养方法。

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