重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体变体(R-TRAIL)的HPLC纯度分析方法研究

作     者：王玉 袁建雷 于泉 韦利军 丁黎 WANG Yu;YUAN Jian-lei;YU Quan;WEI Li-jun;DING Li

作者机构：中国药科大学药学院江苏南京210009 常州千红生化制药股份有限公司江苏常州213022 

出 版 物：《药物生物技术》 (Pharmaceutical Biotechnology)

年 卷 期：2014年第21卷第5期

页      面：437-440页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 10[医学] 

基　　金：国家科技重大专项--重大新药创制(No.2009ZX09103-675) "国家科技重大专项--重大新药创制"(No.2012ZX09401012) 常州市科技支撑计划(社会发展)(No.CE20115044) 

主　　题：R-TRAIL 纯度 反相高效液相色谱法 分子排阻高效液相色谱法 质谱 

摘      要：对R-TRAIL纯度检测方法进行了研究,应用SEC-HPLC和RP-HPLC对其进行纯度分析,并采用质普法(MS)对各成分分子质量进行分析。结果显示SEC-HPLC纯度分析时R-TRAIL表现为单一峰;而RP-HPLC纯度分析时表现出3个主峰,经MS测定该3个峰的分子质量分别对应R-TRAIL的单体、二聚体和三聚体;将RPHPLC收集的3个单峰分别进行RP-HPLC分析时每个单峰仍表现出同样的3个峰。经分析,是由于检测过程中的有机溶剂和反相色谱层析柱填料表面强疏水环境致使R-TRAIL部分解聚造成的,反应出的并不是该蛋白药物在原液中的真实状态和纯度。而在原液中R-TRAIL的自然状态为单一的三聚体形式。因此,SEC-HPLC方法更适用于R-TRAIL的纯度检测。