人CD20基因在鼠NIH-3T3细胞膜上的表达

作     者：洪海燕 孙英勋 郭燕翔 王建安 赖春宁 戚中田 沈倍奋 

作者机构：第二军医大学微生物教研室!上海200433 军事医学科学院基础医学研究所!北京100850 

出 版 物：《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》 (生物化学与生物物理学报(英文版))

年 卷 期：2000年第32卷第4期

页      面：430-433页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家“8 63”计划资助项目 !No .10 2 0 9 0 1 0 3&& 

主　　题：人CD20 基因转染 免疫 

摘      要：应用RT PCR方法 ,从Raji细胞总RNA中扩增得到编码人CD2 0分子的cDNA ,克隆到pGEM TEasy载体上 ,用通用引物分别从T7和SP6两个启动子的不同方向进行测序 ,结果与GenBank中人CD2 0cDNA序列一致。将cDNA克隆到 pcDNA3.1真核表达载体上 ,转染NIH 3T3细胞 ,APAAP检测到转染的细胞表面有CD2 0分子表达。培养转染后的CD2 0 + 细胞 ,腹腔注射免疫小鼠 ,Raji细胞检测免疫后的血清效价为 1∶40 0 ,小鼠脾脏用于细胞融合研制CD2 0分子的单克隆抗体。目前 ,初步确认有 2株杂交瘤细胞分泌CD2 0分子的McAb。