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亲和层析纯化重组人源性抗HBsAg Fab抗体

Purification of recombinant humanized anti-HBsAg Fab antibody by affinity chromatography

作     者:邓宁 陈文吟 向军俭 饶桂荣 唐勇 

作者机构:暨南大学生命科学技术学院分子免疫学与抗体工程实验室广东广州510632 解放军第458医院广东广州510602 

出 版 物:《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期:2004年第20卷第5期

页      面:575-577页

核心收录:

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基  金:广州市科技局重点项目资助 (No .2 0 0 3J1 C0 1 71 ) 国家自然科学基金项目资助 (No .40 3760 30 ) 

主  题:HBsAg 重组Fab 抗scFv单克隆抗体 亲和层析 

摘      要:目的 :纯化酵母发酵产生的重组人源性抗HBsAgFab抗体 ,建立稳定、适于生产应用的纯化工艺。方法 :以原核表达的重组人源性抗HBsscFv免疫BALB/c小鼠 ,经杂交瘤技术制备大量分泌mAb的杂交瘤细胞株 14F7。将该细胞株注入小鼠腹腔制备mAb腹水 ,经辛酸沉淀纯化后 ,制备亲和层析柱 ,纯化酵母发酵产生的重组人源性抗HBsAgFab抗体。结果 :用抗scFvmAb亲和层析柱纯化的重组人源性抗HBsAgFab的纯度可达 95 %以上 ,回收率可达 70 %~ 85 %。结论 :人源性抗HBsscFv制备mAb作为亲和层析的介质 ,可有效地从酵母发酵上清中纯化重组人源性抗HBsAgFab,适用于大规模生产重组人源性抗HBsAgFab。

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