RACK1通过影响MCM7磷酸化促进肺癌细胞的增殖

作     者：李墨 吴非 张恒 韩艳玲 刘俊 陈小龙 韩昱晨 LI Mo;WU Fei;ZHANG Heng;HAN Yan-ling;LIU Jun;CHEN Xiao-long;HAN Yu-chen

作者机构：中国医科大学基础医学院病理教研室 中国医科大学附属第一临床学院病理科沈阳110001 辽宁省肿瘤医院病理科沈阳110042 包头医学院第二附属医院放疗科包头014030 沈阳市苏家屯区妇婴医院病理科沈阳110101 

出 版 物：《肿瘤》 (Tumor)

年 卷 期：2012年第32卷第3期

页      面：149-158页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:30971114) 

主　　题：肺肿瘤 蛋白激酶C 微小染色体维持蛋白7 磷酸化 

摘      要：目的:研究蛋白激酶C受体1(receptor for activated Ckinase1,RACK1)基因沉默或过表达对大细胞肺癌细胞系H460及肺腺癌细胞系A549细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用脂质体转染法分别将针对RACK1基因的RACK1siRNA和重组质粒pCMV-sport6-RACK1转入H460和A549细胞中。采用MTT法和集落形成实验分析RACK1基因对细胞增殖的影响,FCM检测其对细胞周期的影响;采用酵母双杂交法、免疫共沉淀法、激光共聚焦显微术及磷酸化蛋白免疫共沉淀法检测RACK1表达与肺癌细胞增殖之间的关系。结果:转染RACK1siRNA后,H460和A549细胞中RACK1蛋白的表达量明显下调,细胞的增殖能力和集落生成数明显降低,S期细胞所占比例明显下降(P0.01);转染pCMV-sport6-RACK1后,H460和A549细胞中RACK1蛋白的表达量明显上调,细胞的增殖能力增强,倍增时间增加,集落生成数明显增多,S期细胞所占比例明显升高(P0.01)。采用酵母双杂交法和免疫共沉淀法检测发现,RACK1与MCM7存在直接作用。RACK1进入细胞核内,与微小染色体维持蛋白7(minichromosome maintenance protein7,MCM7)特异性结合,促进MCM7蛋白磷酸化。结论:RACK1通过直接与MCM7结合促进MCM7蛋白磷酸化途径,继而促进肺癌细胞增殖。