免疫组织化学方法在人/山羊嵌合体人源细胞鉴定中的应用

作     者：巩芷娟 黄淑帧 

作者机构：上海市儿童医院上海医学遗传研究所上海交通大学200040 

出 版 物：《中华检验医学杂志》 (Chinese Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期：2005年第28卷第1期

页      面：74-78页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

基　　金：国家"8 63"高技术计划基金资助项目 (2 0 0 2AA2 160 91) 

主　　题：肾组织 嵌合体 阳性 细胞鉴定 PCNA HSC 免疫组织化学方法 HSA 增殖期 细胞存活 

摘      要：目的 在胎山羊宫内移植人造血干细胞 (hHSC)获得人 /山羊嵌合体基础上 ,应用免疫组织化学技术分析嵌合体实验山羊肝、肺和肾组织中人源细胞的生长及分化情况。方法 对 7头经荧光激活的细胞分选 (FACS)、荧光原位杂交 (FISH)和分子生物学方法鉴定为阳性的实验山羊 ,在出生后不同时间取其肝、肺和肾组织 ,制作石蜡切片 ,然后采用免疫组织化学的EnVision系统 ,用特异性人增殖期细胞核抗原 (PCNA)单抗、人肝细胞特异性抗原 (HSA)单抗及人 β 2微球蛋白 (β 2M )单抗鉴定这些组织中的人源细胞。结果 7头实验山羊的肝组织中有一定比例的PCNA和HSA抗体阳性染色细胞 ,肺和肾组织内有PCNA及 β 2M抗体阳性染色细胞 ,正常人的肝、肺和肾细胞也呈阳性染色 ,而非hHSC移植的正常山羊的肝、肺和肾组织中未见有阳性染色细胞。结论 胎山羊宫内移植hHSC所形成的嵌合体的肝脏中有人源细胞存活 ,并检测到表达人肝细胞特异抗原的人肝样细胞。免疫组化鉴定的阳性结果与分子生物学等方法的鉴定结果相符。此外 ,在嵌合体山羊肺和肾组织中也发现有人源细胞。