新城疫病毒F48E9感染CEF细胞特异性表达基因的筛选鉴定

作     者：杨新艳 刘培欣 曹殿军 闫丽辉 孙建宏 单文鲁 YANG Xin-yan;LIU Pei-xin;CAO Dian-jun;YAN Li-hui;SUN Jian-hong;SHANG Wen-lu

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001 新疆农业大学新疆乌鲁木齐830052 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2005年第27卷第4期

页      面：260-263页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 090601[农学-基础兽医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：DDRT-PCR 新城疫病毒 鸡胚成纤维细胞 基因表达 

摘      要：分别以NDVF48E9和LaSota株感染鸡胚成纤维细胞,于感染后8h提取NDV感染CEF细胞总RNA,通过mR NA差异显示技术筛选病毒感染诱导表达的特异性基因。主要方法是先以锚定引物经反转录后,然后以9～10bp随机引物为上游引物,以锚定引物Oligod(T)18为下游引物,进行PCR扩增,PCR产物采用8%的尿素变性PAGE胶电泳进行分离鉴定。对于特征性差异带进行第二次PCR扩增,克隆后测定其核苷酸序列。结果我们发现数个差异条带,选取差异带在500bp以内的条带,经测序后显示经NDVF48E9感染后,有一条差异条带特异性表达的基因所编码的蛋白与Receptor(TNFRSF)_interactingserine_threoninekinase2有47%同源,是一个新基因,其蛋白功能不明确,有可能和细胞的凋亡有关。