1-甲基色氨酸联合外周血单个核细胞对人胶质瘤细胞的免疫杀伤作用

作     者：赵程程 张猛 张秋生 王传方 刘文兰 李维平 Zhao Chengcheng;Zhang Meng;Zhang Qiusheng;Wang Chuanfang;Liu Wenlan;Li Weiping

作者机构：广州医科大学510182 深圳市第二人民医院(深圳大学第一附属医院)神经外科 神经外科重点实验室 中心实验室 汕头大学医学院 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2015年第32卷第3期

页      面：528-530页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：吲哚胺-2,3-双加氧酶 胶质瘤细胞 外周血单个核细胞 脱噬作用 

摘      要：目的 观察吲哚胺-2,3-双加氧酶（IDO）抑制剂1-甲基色氨酸（1-MT）联合外周血单个核细胞（PBMC）对人胶质瘤细胞A172的免疫杀伤作用.方法 采用Ficoll密度梯度离心分离健康人外周血制备PBMC,根据是否联合1-MT分组.细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测梯度1-MT（0、25、125、250、500 μmol/L;1、2、4、8、10 mmol/L）联合PBMC对A172细胞存活率影响.1-MT（500 μmol/L）联合PBMC与A172细胞共培养,流式双染术检测A172细胞凋亡率,Western blot检测A172细胞IDO蛋白表达,实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测PBMC中调节T细胞叉头样螺旋转录因子（Foxp3） mRNA表达.结果 在PBMC数量一定情况下,1-MT呈剂量依赖性抑制A172细胞存活率;1-MT联合PBMC组细胞凋亡比率（45.0％）显著高于PBMC组（20.0％）及1-MT组（33.7％）;PBMC组A172细胞IDO蛋白相对表达量（0.313±0.017）明显高于1-MT联合PBMC组（0.182±0.015,P0.01）,1-MT、A172空白组未见明显IDO蛋白表达;PBMC组PBMC中Foxp3mRNA表达（2.764±0.180）明显高于1-MT联合PBMC组（2.189 ±0.179,P0.05）及PBMC空白组（1.000±0.028,P0.01）,1-MT联合PBMC组明显高于PBMC空白组（P0.01）.结论 1-MT可抑制IDO表达,下调PBMC中Foxp3转录因子表达,降低调节性T细胞增殖分化,可增强PBMC对胶质瘤细胞免疫杀伤作用.