复式PCR检测间日疟原虫和恶性疟原虫的现场应用

作     者：顾亚萍 周华云 曹俊 朱国鼎 陶志勇 刘耀宝 朱韩武 GU Ya-ping;ZHOU Hua-yun;CAO Jun;ZHU Guo-ding;TAO Zhi-yong;LIU Yao-bao;ZHU Han-wu

作者机构：江苏省血吸虫病防治研究所、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡214064 蚌埠医学院病原生物学教研室 湖南省郴州市疾病预防控制中心 

出 版 物：《中国血吸虫病防治杂志》 (Chinese Journal of Schistosomiasis Control)

年 卷 期：2012年第24卷第3期

页      面：298-302页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：江苏省卫生厅科研项目(X200734) 

主　　题：恶性疟原虫 间日疟原虫 复式PCR 现场应用 

摘      要：目的探讨复式PCR方法在疟疾诊断中的现场应用价值。方法根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化PCR反应体系,建立在同一PCR反应体系中同时检测间日疟原虫、恶性疟原虫基因组特异性DNA片段的疟疾诊断方法,并评价其现场应用价值。结果间日疟原虫和恶性疟原虫基因组DNA经过复式PCR后,分别扩增出1 451 bp和833 bp的特异性条带,而伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫及健康人血样均无扩增带出现,用该反应体系可检出原虫血症为1.1×10-6和5.6×10-7的间日疟原虫和恶性疟原虫感染。与镜检法相比,复式PCR检测119份现场样本,112份与镜检结果相同,阳性率为54%,漏诊率为0.8%,误诊率为0,而镜检法依次分别为53%、1.7%和3.4%。结论复式PCR方法检测疟原虫具有简便、快速、特异、敏感等优点,在疑似病例的鉴别诊断和分子流行病学调查中具有良好的应用价值。