人临床株幽门螺旋杆菌热休克蛋白A亚单位基因克隆及序列分析

作     者：王明永 王凡平 郭庆合 邢志广 吴升伟 吴承龙 

作者机构：新乡医学院医学检验系河南新乡453003 新乡医学院第二附属医院检验科河南新乡453000 贵阳医学院微生物学教研室贵州贵阳550004 

出 版 物：《新乡医学院学报》 (Journal of Xinxiang Medical University)

年 卷 期：2009年第26卷第5期

页      面：453-456页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：幽门螺杆菌 HspA亚单位 克隆 基因序列 

摘      要：目的获取人临床株幽门螺旋杆菌（Hp）热休克蛋白A（HspA）亚单位基因。方法用聚合酶链反应（PCR）技术从Hp的染色体DNA扩增HspA基因，将其定向插入paMD18-T范隆载体中进行核苷酸序列分析。结果经酶切鉴定及基因序列证实HpHspA基因克隆成功。克隆载体pMD—HspA洲序结果显示HspADNA片段长度为357bp。利用生物软件Omiga2．0对临床分离的Hp和NCTC11637HspA基因序列进行同源性比较，发现有14个核苷酸差异，基因序列同源性96．08％；对编码氨基酸进行比较，发现有1个氨基酸差异，氨基酸同源性99．15％。同时将HpHspA序列与GenBank中公布的多株国外HpHspA序列进行比较，结果显示基因序列同源性在95．20％-96．36％之间，氨基酸序列同源性在98．31％一100％之间。结论成功地获得人临床株Hp保守的HspA基因，为HpHspA相关疫苗的研究奠定了实验基础。