实时定量PCR技术与短时培养法检测尿样本HCMV的比较

作     者：向稚丹 方峰 甄宏 徐翼 刘隽 聂兴草 XIANG Zhidan;Fang Feng;Zheng Hong;Xu Yi;Liu Jun;Nie Xingcao

作者机构：华中科技大学同济医学院同济医院儿科病毒研究室湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院协和医院干细胞研究中心 

出 版 物：《临床儿科杂志》 (Journal of Clinical Pediatrics)

年 卷 期：2005年第23卷第7期

页      面：434-436,443页

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

主　　题：实时定量PCR 短时培养法 人巨细胞病毒 尿样本 

摘      要：目的建立实时定量PCR系统定量检测尿样本中HCMV并与短时培养快速诊断半定量法比较。方法根据HCMVul123基因保守区设计特异性引物和taqman探针,以GAPDH为内参照校准所检测样本的细胞数,建立实时定量PCR检测系统,定量检测132份尿标本中HCMV拷贝数与短时培养结果比较,并同时分析19例接受更昔洛韦治疗前后尿排毒量的变化。结果132份尿标本实时定量PCR结果:短时培养(-)组HCMVDNA为(83±155)拷贝/5×105细胞(n=16例),(+)组为(571±231)拷贝/5×105细胞(n=26例),(++)组为(792±303)拷贝/5×105细胞(n=35例),(+++)组为(1126±416)拷贝/5×105细胞(n=16例),(++++)组为(2201±1043)拷贝/5×105细胞(n=9例);19例38份更昔洛韦治疗前后尿样本中3例治疗前后短时培养结果无改变,而实时定量结果明显改变。结论实时定量PCR法比短时培养法更适于评价抗病毒疗效,而短时培养法判断HCMV是否为活动感染优于实时定量PCR法。