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重组腺病毒HBV preS2/S-AD5的构建及生物安全性初步研究

Initial evaluation of the biosafty of recombinant HBV preS2/S-AD5

作     者:李志会 岳盈盈 邢来田 张凤丽 李妍 刘菊华 李鹏 万言珍 孟红 LI Zhi-hui;YUE Ying-ying;XING Lai-tian;ZHANG Feng-li;LI Yan;LIU Ju-hua;LI Peng;WAN Yan-zhen;MENG Hong

作者机构:山东省医学科学院基础医学研究所山东省现代医用药物与技术重点实验室济南250062 

出 版 物:《山东大学学报(医学版)》 (Journal of Shandong University:Health Sciences)

年 卷 期:2009年第47卷第5期

页      面:27-30页

学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基  金:山东省科技发展计划项目(013130104) 

主  题:HBV preS2/S 重组腺病毒载体 复制型腺病毒 

摘      要:目的构建重组腺病毒HBVpreS2/S-AD5,并对其生物安全性进行初步评价。方法应用clontech公司的第一代腺病毒载体构建重组腺病毒质粒HBVpreS2/S-AD5,酶切线性化后分4次用脂质体方法转染HEK293细胞包装成复制缺陷型腺病毒HBYpreS2/S-AD5,分别命名为N1~4。扩增并滴定毒力后,接种Hep2、Hela和A549细胞,观察HBVpreS2/S-AD5在非容许细胞的增殖情况;同时,用N1~4分别鼻腔接种SPF级BALB/C小鼠,每日观察小鼠一般情况,第10d取小鼠重要组织并用福尔马林固定,做病理学检查。结果4株重组腺病毒HBVpreS2/S-AD5第1代N1、第4代N2、第6代N3、第8代N4株接种的细胞未见病变,接种的小鼠无一般状况改变,组织病理也未见任何改变;而第11代N1株重组腺病毒能在非容许细胞增殖并致细胞病变,接种的小鼠出现严重腹泻,并且小鼠肠、肺组织有明显的病理改变。结论本实验室构建的重组腺病毒HBVpreS2/S-AD5有突变为复制型腺病毒的现象,并可导致小鼠出现腹泻和轻型肺部炎症。

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