大鼠SCN5A基因内含子1 +204 bp^+757 bp转录调控功能分析

作     者：刘宇 李晖 董钦 张振明 李凤兰 李金波 马宁 LIU Yu;LI Hui;DONG Qin;ZHANG Zhenming;LI Fenglan;LI Jinbo;MA Ning

作者机构：哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨市150081 

出 版 物：《医学分子生物学杂志》 (Journal of Medical Molecular Biology)

年 卷 期：2007年第4卷第2期

页      面：108-111页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：黑龙江省自然科学基金(NoD2005-29) 哈尔滨医科大学研究生创新基金 

主　　题：SCN5A基因 转录调控 报告基因分析 顺式作用元件 

摘      要：目的克隆大鼠心肌SCN5A基因5′端调控区,检测目的片段在HEK293细胞中的转录活性。方法扩增大鼠心肌SCN5A基因+204 bp^+757 bp、+204 bp^+385 bp和+204 bp^+329 bp片段,构建含目的片段的荧光素酶报告基因——pGL3-P0、pGL3-P1和pGL3-P2,比较HEK293细胞中荧光素酶活性,评价不同长度DNA片段的转录调控活性。结果成功构建大鼠心肌SCN5A基因5′端3个片断的荧光素酶报告基因,HEK293细胞中pGL3-P1相对荧光素酶活性分别为pGL3-P0、pGL3-P2的4.3倍和2.8倍。结论SCN5A基因内含子1目的片段在HEK293细胞中具有较强的转录调控活性;SCN5A基因+329 bp^+385 bp为正调控区,软件分析MZF1、USF、C-ETs-1等因子能与这些正调控区域结合并可能参与SCN5A基因的表达调控。