泛素化调节膜联蛋白A2表达异常在乳腺癌中的作用研究

作     者：幸天勇 侯令密 邓世山 XING Tian-yong;HOU Ling-mi;DENG Shi-shan

作者机构：川北医学院附属医院普外三科四川南充637000 川北医学院附属医院肝胆胰肠研究所四川南充637000 川北医学院附属医院人体解剖学教研室四川南充637000 

出 版 物：《中华妇幼临床医学杂志（电子版）》 (Chinese Journal of Obstetrics & Gynecology and Pediatrics(Electronic Edition))

年 卷 期：2013年第9卷第2期

页      面：130-134页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助课题(81172496) 

主　　题：乳腺癌 膜联蛋白2 泛素化 免疫蛋白质组学 临床分期 

摘      要：目的探讨乳腺癌组织中膜联蛋白(annexin)A2表达异常及其泛素化调节机制,annexin A2与乳腺癌TNM临床分期的关系,泛素化调节annexin A2表达异常在乳腺癌发生发展中的作用。方法选择2008年9月至2009年9月在本院普外三科确诊为乳腺癌的10例患者手术切除的新鲜组织,包括组织病理学证实的乳腺癌组织10份及癌旁形态学相对正常组织10份(直径2cm)为研究对象。组织切除后,立即液氮保存待用。采用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)技术,对乳腺癌组织及其癌旁正常组织的蛋白质进行分离,Western bloting法检测该蛋白质的泛素化(免疫蛋白质组学)情况,取稳定出现的差异阳性蛋白质点进行基质辅助激光解吸/电离时间飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)、质谱/质谱串联(MS-MS)及生物信息学分析。通过免疫组化染色技术,对annexin A2在乳腺癌组织及其癌旁正常组织中的表达水平,与乳腺癌TNM临床分期的关系进行观察,并对结果进行统计学分析(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,征得受试对象本人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。结果对4个在乳腺癌组织标本及其癌旁正常组织中明显表达差异的蛋白质点,经质谱鉴定和数据库比对的结果为小泛素相关修饰因子3前体(SMT3A)、蛋白酶体亚单位a型1(PSMA1)、annexin A2及核糖体蛋白S12(RPS12)。免疫组化检测在TNM临床分期为0,Ⅰ,Ⅱ及Ⅲ期的乳腺癌组织标本中,annexin A2表达的阳性率及强阳性率分别为75.0%(6/8)与37.5%(3/8),100.0%(14/14)与42.9%(6/14),100.0%(10/10)与66.7%(4/6)及100.0%(6/6)与50.0%(5/10)。在TNM临床分期不同的乳腺癌组织中,annexin A2表达的阳性率及强阳性率比较,差异均有统计学意义(P0.05)。annexin A2的表达水平与乳腺癌的TNM临床分期呈正相关(r=0.508,P0.05)。结论 annexin A2在乳腺癌组织中的表达受泛素化调节,且表达增高。乳腺癌TNM临床分期越晚,annexin A2表达水平越高。泛素化调节annexin A2的高表达,可能与乳腺癌的发生发展有关。