猪繁殖与呼吸综合征病毒和牛病毒性腹泻病毒双重RT-PCR检测方法的建立

作     者：王克伟 李玉峰 王先炜 马涛 张国龙 姜平 WANG Ke-wei;LI Yu-feng;WANG Xian-wei;MA Tao;ZHANG Guo-long;JIANG Ping

作者机构：南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室江苏南京210095 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2011年第43卷第1期

页      面：1-4页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30871868) 教育部博士点基金项目(20060307007) 国家科技支撑计划(2007BAD86B02-3 2006BAD06A04) 国家重大转基因专项(2009ZX08009-143B) 

主　　题：猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪源牛病毒性腹泻病毒 双重RT—PCR 

摘      要：根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5 端非编码区基因序列,设计合成了1对特异性引物,参考本实验室针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白设计的引物,经过PCR反应条件的优化,建立了BVDV和PRRSV双重RT-PCR的检测方法。对于PRRSV和BVDV的cDNA最低检测量分别为3.8×10-4 ng和7×10-4 ng,对于猪瘟病毒(CFSV)、脑心肌炎病毒(EMCV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)的PCR扩增结果均为阴性;用该方法对江苏省不同地区采集的75份仔猪的肺脏、脾脏和淋巴结等病料进行了检测,结果PRRSV有55份阳性,BVDV有14份阳性,PRRSV和BVDV混合感染的有12份,与PRRSV和BVDV单一RT-PCR的检测结果符合率分别为89.3%和92%。证明建立的双重RT-PCR检测方法可用于临床样品中BVDV和PRRSV的检测。