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梓醇促大鼠骨髓间充质干细胞骨向分化的机制研究

Mechanisms of catalpol-induced osteogenic differentiation in SD rat bone marrow mesenchymal stem cells

作     者:傅淑平 杨丽 龚理 李潇潇 袁璟 王军蒙 张荣华 FU Shu-ping;YANG Li;GONG Li;LI Xiao-xiao;YUAN Jing;WANG Jun-meng;ZHANG Rong-hua

作者机构:南京中医药大学针药结合教育部重点实验室江苏南京210023 暨南大学药学院中药教研室广东广州510632 新疆医科大学附属中医医院新疆乌鲁木齐830000 

出 版 物:《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期:2019年第35卷第5期

页      面:907-913页

核心收录:

学科分类:1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金资助项目(No.81774403 No.81403479 No.81473509) 江苏省自然科学基金资助项目(No.BK20171492) 江苏省六大人才高峰项目(No.YY-023) 江苏省第五期"333高层次人才培养工程" 

主  题:梓醇 骨髓间充质干细胞 成骨分化 Runx2 骨钙素 Wnt信号通路 

摘      要:目的:探讨梓醇促SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)骨向分化的作用机制。方法:(1)细胞分为对照组、成骨诱导组及梓醇组。4-氨基安替吡啉测酚法检测诱导第7、14和21天各组细胞上清碱性磷酸酶(ALP)活性,ALP染色法检测诱导第14天各组细胞ALP阳性染色率,茜素红染色法检测诱导第21天各组细胞矿化结节数;(2)运用real-time PCR法检测诱导第7、14和21天各组细胞中Runx2、骨钙素(osteocalcin)、β-连环蛋白(β-catenin)、Wnt3a、Wnt5a及Wnt11的mRNA表达水平。结果:(1)2.0 mg/L梓醇可增加BMSCs上清中ALP活性及细胞ALP的阳性染色率,同时促进BMSCs矿化结节的形成(P0.05)。(2)梓醇促BMSCs骨向分化时,Runx2的mRNA表达水平于第14天时达到峰值,随后开始下降,第21天时与对照组无统计学差异;osteocalcin的mRNA相对表达量在第7天时高于对照组,随后持续上升直至第21天。(3)与对照组相比,梓醇促BMSCs骨向分化时,β-catenin与Wnt3a的mRNA相对表达量均于第14和21天时升高并维持在较高水平,而Wnt5a及Wnt11的mRNA相对表达量在第14天达到峰值后开始下降,第21天时Wnt11 mRNA相对表达量显著低于对照组。结论:梓醇通过上调Runx2的表达,促使BMSCs向成骨细胞方向分化,同时还通过增加细胞ALP分泌及osteocalcin的表达,促进细胞矿化的发生,从而促使新生成骨细胞的成熟,此作用可能与其有序激活Wnt信号通路相关。

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