microRNA-708-5p对骨肉瘤细胞凋亡与迁移的作用及机制

作     者：丰天宇 朱中凯 王豪 毛筱涵 刘丹 袁仁杰 刘跃华 左国伟 张明昊 Feng Tianyu;Zhu Zhongkai;Wang Hao;Mao Xiaohan;Liu Dan;Yuan Renjie;Liu Yuehua;Zuo Guowei;Zhang Minghao

作者机构：重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室重庆400016 重庆医科大学附属第一医院心血管内科重庆400016 重庆医科大学实验教学管理中心重庆400016 

出 版 物：《中国细胞生物学学报》 (Chinese Journal of Cell Biology)

年 卷 期：2019年第41卷第3期

页      面：446-455页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(批准号:81102035) 重庆市卫生经济学会基金(批准号:YWJK2017-1)资助的课题 

主　　题：miRNA-708-5p 骨肉瘤 凋亡 迁移 ZEB1 

摘      要：该文主要研究microRNA-708-5p(miR-708-5p)在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞凋亡、迁移的影响及机制。该研究利用miRNA基因芯片筛选差异表达miRNA; qRT-PCR(quantitative Realtime PCR)检测miR-708-5p在骨肉瘤细胞株MG63和正常细胞hMSC、HS-5中的表达;通过阳离子脂质体介导法过表达miR-708-5p;分别用Hoechst 33258染色、流式细胞术、划痕实验、Transwell法检测凋亡和迁移;通过qRT-PCR检测miR-708-5p、ZEB1(Zinc?nger E-box binding homeobox 1)的RNA水平; Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、ZEB1蛋白表达;利用TargetScan和双荧光素酶报告实验预测并验证miR-708-5p与ZEB1的靶向关系。结果显示, miR-708-5p在MG63中表达下调,恢复miR-708-5p表达水平可诱导MG63细胞凋亡并抑制迁移。Western blot结果显示,过表达miR-708-5p可上调E-cadherin,下调N-cadherin和ZEB1。双荧光素酶报告实验显示, miR-708-5p可直接靶向ZEB1。敲低ZEB1可抑制MG63迁移。该项研究结果表明, miR-708-5p可诱导骨肉瘤细胞凋亡,且通过靶向ZEB1来抑制迁移。