白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促动力学特征

作     者：夏涛 王昌权 陈浩 郑林 巩仔鹏 李月婷 李勇军 黄勇 潘洁 XIA Tao;WANG Changquan;CHEN Hao;ZHENG Lin;GONG Zipeng;LI Yueting;LI Yongjun;HUANGYong;PAN Jie

作者机构：贵州省药物制剂重点实验室/药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550004 民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004 

出 版 物：《中国药房》 (China Pharmacy)

年 卷 期：2019年第30卷第10期

页      面：1316-1320页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100704[医学-药物分析学] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81460630 U1812403) 贵州省科技计划项目(No.黔科合平台人才〔2016〕5613 〔2016〕5677 〔2017〕5601) 贵州省普通高等学校科技拔尖人才支持计划(No.黔教合KY字〔2018〕050) 贵阳市科技计划项目(No.筑科合同〔2017〕30-29) 

主　　题：白及 Militarine 肝微粒体 代谢途径 酶促动力学 

摘      要：目的:研究白及有效成分Militarine在肝微粒体中的体外代谢途径及其酶促反应动力学特征。方法:建立大鼠和人肝微粒体体外孵育体系,对Militarine进行体外孵育反应;采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术,结合UNIFI数据库并参考文献对其代谢产物进行结构鉴定。同时,以葛根素为内标,采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱联用技术对Militarine在大鼠肝微粒体中的代谢转化量进行定量分析,通过GraphPad Prism 5.0软件拟合代谢转化曲线,并计算在有/无还原性辅酶Ⅱ(NADPH)参与的反应条件下的Militarine酶促动力学参数[最大清除速率(v_(max))、米氏常数(k_m)、固有清除率(CL_(int))]。结果:Militarine在大鼠和人肝微粒体中孵育后,生成了1个化学式为C_(21)H_(29)O_(11)的化合物,推测其为Militarine的酯键水解代谢产物。酶促动力学研究显示,有/无NADPH参与的Militarine酶促反应的v_(max)分别为1.955、2.129 nmol/(h·mg),k_m分别为8.601、9.854 nmol/mL,CL_(int)分别为0.227 3、0.216 1 mL/(h·mg),两者无明显差异。结论:Militarine在肝微粒体中的主要代谢途径为C1或C4位酯键的水解;其代谢不依赖于由NADPH启动反应的细胞色素P_(450)酶代谢途径。