CREB诱骗寡核苷酸抑制吗啡依赖诱导SK-N-SH细胞神经元型一氧化氮合酶及fosB基因表达上调

作     者：苏彦君 丛斌 张国忠 张瑾 姚玉霞 李淑瑾 付丽红 SU Yan-Jun;CONG Bin;ZHANG Guo-zhong;ZHANG Jin;YAO Yu-xia;LI Shu-jin;FU Li-hong

作者机构：河北医科大学法医学教研室河北石家庄050017 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2005年第21卷第7期

页      面：837-841页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 071007[理学-遗传学] 10[医学] 

基　　金：河北省医学适用技术跟踪资助项目(No2001-54) 

主　　题：吗啡 SK—N—SH细胞 CREB诱骗寡核苷酸 电泳迁移率改变分析 一氧化氮合酶 fosB 

摘      要：目的研究转录因子CREB的结合位点cAMP反应元件(cAMPresponseelement,CRE)的诱骗寡核苷酸(CREtranscriptionfactordecoyoligodeoxynucleotide,CREdecoyODN)对吗啡依赖SKNSH细胞的神经元型一氧化氮合酶(Neuronalnitricoxidesynthase,nNOS)及fosBmRNA表达上调的抑制作用。方法建立吗啡依赖SKNSH细胞模型,体外合成含CRE序列的寡核苷酸,作为CREdecoyODN,与阳离子脂类N[1(2,3dioleoyloxy)propyl]N,N,Ntrimethylammoniummethylsulfate(DOTAP)混合后导入细胞。采用放射自显影检测细胞内参入的CREdecoyODN。采用电泳迁移率改变分析(Electrophoresismobilityshiftassay,EMSA)及RTPCR技术,分别检测CREdecoyODN对吗啡依赖诱导的CREB的DNA结合活性、nNOS及fosBmRNA表达的影响。结果CREdecoyODN可在细胞内稳定存在,特异抑制吗啡依赖SKNSH细胞CREB的DNA结合活性升高、nNOS和fosBmRNA表达上调。结论CREdecoyODN通过特异抑制吗啡依赖SKNSH细胞的CREB的DNA结合活性而下调nNOS及fosBmRNA表达。