脲原体属和人型支原体体外药物敏感性及其对喹诺酮类药物耐药机制分析:单中心回顾性研究

作     者：刘亚丽 张文娟 王洁 叶莎 赵颖 王贺 窦红涛 郭莉娜 王瑶 孙宏莉 刘文静 张小江 谢秀丽 原英 杨启文 徐英春 LIU Ya-li;ZHANG Wen-juan;WANG Jie;YE Sha;ZHAO Ying;WANG He;DOU Hong-tao;GUO Li-na;WANG Yao;SUN Hong-li;LIU Wen-jing;ZHANG Xiao-jiang;XIE Xiu-li;YUAN Ying;YANG Qi-wen;XU Ying-chun

作者机构：中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科北京100730 "侵袭性真菌病机制研究与精准诊断"北京市重点实验室北京100730 保定市传染病医院检验科河北保定071000 河北省人民医院检验科石家庄050000 巴州人民医院检验科新疆库尔勒841000 

出 版 物：《协和医学杂志》 (Medical Journal of Peking Union Medical College Hospital)

年 卷 期：2019年第10卷第3期

页      面：249-256页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：中国医学科学院医学与健康科技创新工程重大协同创新项目(2016-I2M-1-014) 

主　　题：脲原体属 人型支原体 药敏试验 喹诺酮 耐药 

摘      要：目的分析脲原体属和人型支原体体外药物敏感性特点,并分析其对喹诺酮类药物耐药的相关机制。方法回顾性总结北京协和医院2012年9月至2017年4月通过体外培养方法检测出的脲原体属和人型支原体标本,结合患者临床资料和菌种鉴定结果分析其体外药物敏感性特点。针对喹诺酮类药物耐药特点,采用普通PCR法扩增目的基因并测序,将测序结果翻译成蛋白质序列,与NCBI数据库中参考序列进行比对,检测DNA促旋酶(GyrA/GyrB)和拓扑异构酶Ⅳ(ParC/ParE)序列的突变情况。结果脲原体属混合人型支原体的体外敏感性总体低于脲原体属或人型支原体单独体外敏感性;除大环内酯类外,脲原体属对喹诺酮类、四环素类、交沙霉素、原始霉素、强力霉素的敏感性普遍低于人型支原体,但差异无统计学意义(P均0. 05)。女性患者体内分离得到的脲原体属对阿奇霉素、红霉素、克拉霉素、氧氟沙星的体外敏感性较男性低(P均0. 05)。微小脲原体对大部分抗菌药物的敏感性高于解脲脲原体,尤以对四环素的敏感率差异最大(98. 48%比72. 73%,差值25. 8%,P0. 05)。在GyrA、 GyrB、 ParC和ParE的序列比对中,共发现21个突变位点,其中ParC S83L突变占96. 22%(51/53),为最主要突变位点;其余为ParC A136T突变、ParE R448K突变、GyrA L176F和ParC S83L联合突变等以及6个目前尚未报道过的突变位点,即ParC的L540F、R718W、Q767E、S789N、M828I和I831T突变。结论脲原体属和人型支原体的体外药物敏感性与感染种属有关,脲原体属的体外敏感性还与菌种、患者性别有关。对脲原体属喹诺酮类耐药的机制研究表明,单独ParC S83L突变是脲原体属对喹诺酮类耐药的主要机制,而新发现6个突变位点可能的作用机制仍有待深入研究。