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表达鸡Ⅱ型干扰素重组鸡痘病毒的构建及其特性分析

Construction and Characterization of Recombinant Fowlpox virus Expressing Chicken Type Ⅱ Interferon

作     者:孙永科 王云峰 智海东 刘胜旺 王玫 童光志 SUN Yong-Ke;WANG Yun-Feng;ZHI Hai-Dong;LIU Sheng-Wang;WANG Mei;TONG Guang-Zhi

作者机构:杨凌712100 哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 哈尔滨150001 西北农林科技大学动物科技学院 

出 版 物:《农业生物技术学报》 (Journal of Agricultural Biotechnology)

年 卷 期:2005年第13卷第1期

页      面:81-85页

核心收录:

学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基  金:国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2001AA213041)资助 

主  题:鸡IFN-Ⅱ基因 重组鸡痘病毒 

摘      要:将鸡Ⅱ型干扰素(ChIFNγ)基因插入到鸡痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681-ChIFNγ。将pSY681-ChIFNγ转染已感染亲本鸡痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与鸡痘病毒基因组发生同源重组,产生表达ChIFNγ的重组鸡痘病毒rFPV-ChIFNγ。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选,通过PCR和间接免疫荧光等实验证实获得纯化的、表达ChIFNγ的重组鸡痘病毒。将在鸡胚成纤维细胞中培养72h的rFPV-ChIFNγ上清接种小鼠成纤维细胞(L929),通过细胞病变抑制实验证明重组ChIFNγ具有抑制水疱性口炎病毒复制的活性,培养上清的抗病毒效价为2048U/mL。

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