噬菌体φ297切除酶(xis)基因的克隆和序列分析

作     者：翟静 曹奇志 张媛英 张凤珍 ZHAI Jing;CAO Qi-zhi;ZHANG Yuan-ying;ZHANG Feng-zhen

作者机构：泰山医学院生物化学教研室山东泰安271000 滨州医学院免疫与微生物学教研室山东滨州256603 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2005年第15卷第2期

页      面：1-3页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

主　　题：噬菌体ψ297 埃希氏大肠杆菌(EHEC)O157 Shiga毒素(Stx) 切除酶基因(xis) 特殊位点重组 

摘      要：目的:克隆噬菌体φ297 切除酶(xis)基因,并对其进行遗传与变异研究。方法:提取埃希氏大肠杆菌O157:H7 菌株EH297染色体DNA,采用步移PCR方法寻找目的基因,并通过克隆、亚克隆、DNA测序等分子生物学方法获得切除酶基因,通过序列分析软件对此基因进行分析。结果:克隆获得噬菌体φ297编码的切除酶基因(xis)的完整序列,它的长度是255 bp,编码了一个84个氨基酸组成的蛋白质(Xis),将它们的序列与λ噬菌体的切除酶家族的其它成员进行了比较。其结果是噬菌体φ297的切除酶基因(xis)与噬菌体VT1-Sakai的切除酶基因(xis)只有4个核苷酸的不同,而Xis蛋白与噬菌体VT1-Sakai的Xis蛋白是一样的,与噬菌体933W的Xis蛋白只有47.2%的相似性。结论:噬菌体φ297编码的切除酶基因(xis)与λ噬菌体的切除酶基因同源。