应用接头PCR克隆慢病毒介导的转基因小鼠整合位点旁侧序列

作     者：孟坡 任兆瑞 曾凡一 MENG Po;REN Zhaorui;ZENG Fanyi

作者机构：上海医学遗传研究所上海交通大学附属儿童医院上海市200040 卫生部医学胚胎分子生物学重点实验室暨上海市胚胎与生殖重点实验室上海市200040 上海交通大学医学院医学科学院上海市200025 

出 版 物：《医学分子生物学杂志》 (Journal of Medical Molecular Biology)

年 卷 期：2009年第6卷第4期

页      面：292-296页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30770242) 上海市科委重大支撑项目(No.08dj1400502) 

主　　题：接头PCR 慢病毒转基因小鼠 整合位点 旁侧序列克隆 

摘      要：目的为鉴定慢病毒介导的转基因小鼠中外源基因的整合位点信息，应用接头PCR克隆整合位点旁侧序列。方法小鼠基因组总DNA酶解后与设计的接头片段连接，根据慢病毒的LTR序列设计巢式PCR引物，克隆转基因小鼠整合位点旁侧序列。结果成功克隆到转基因小鼠整合位点的旁侧序列，经过测序定位于小鼠染色体上。结论作为反向PCR的改进，本方法可用于转基因小鼠整合位点旁侧序列的克隆，为分析整合位点与外源基因表达之间的关系等提供了科学依据。