阳离子脂质体介导NF-κB“decoy”ODNs转染巨噬细胞条件的优化

作     者：王建 李金宝 任绪义 邓小明 

作者机构：第二军医大学长海医院麻醉科上海200433 第二军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 

出 版 物：《第二军医大学学报》 (Academic Journal of Second Military Medical University)

年 卷 期：2003年第24卷第8期

页      面：856-858,F004页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：上海市教委曙光计划 

主　　题：阳离子脂质体 NF-κB“decoy”ODNS 基因转染 巨噬细胞 

摘      要：目的 :观察 NF- κB“decoyODNs在阳离子脂质体 lipofectin介导下转染小鼠巨噬细胞 J774 .1的优化参数以及在细胞内的分布。 方法 :改变 ODN与 lipofectin比率、转染时间 ;用流式细胞仪检测细胞内的相对荧光强度和摄取率评价转染效率 ;荧光显微镜观察细胞内荧光分布 ;测定细胞上清乳酸脱氢酶 (L DH)观察细胞损伤情况。 结果 :lipofectin介导转染显著提高 J774 .1细胞对 NF- κB“decoyODNs的摄取 ;在 2 4孔培养板中 ,NF- κB“decoyODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时 ,转染效率最佳而细胞毒性相对较低 ;lipofectin介导转染 6 h后 ,细胞内荧光物质主要聚集于细胞核和部分细胞质中 ,而直接转染时荧光物质多分布于细胞质。结论 :lipofectin可增加 NF-κB“decoyODNs的细胞摄入并改变其细胞内分布 ;NF-κB“decoyODNs与 lipofectin比率 (W/ W)为 1∶ 5、转染 6 h时可获得最佳转染效率。