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时间分辨免疫荧光检测乙肝病毒前S1抗原临床应用

Clinical application of time-resolved fluoroimmunoassay for the detection of hepatitis B virus PreS1 antigen

作     者:俞蕾 胡志刚 刘洁 陈国千 黄飚 

作者机构:南京医科大学附属无锡市第一人民医院检验科江苏无锡214002 无锡市第五人民医院 江苏省原子医学研究所 

出 版 物:《中国实验诊断学》 (Chinese Journal of Laboratory Diagnosis)

年 卷 期:2007年第11卷第12期

页      面:1641-1644页

学科分类:1010[医学-医学技术(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

主  题:PreSl 时间分辨免疫荧光分析(TRFIA) 酶联免疫吸附试验(ELISA) 

摘      要:目的乙型肝炎病毒PreS1抗原时间分辨免疫荧光分析方法临床应用研究。方法应用双抗体夹心免疫荧光分析方法,用抗PreS1单克隆抗体和抗-HBs作为固相抗体和铕标记抗体,若样本中存在PreS1抗原,则形成抗体-抗原-铕标记抗体复合物,加增强液解离铕离子,采用时间分辨荧光测量技术,对样本中乙型肝炎病毒PreS1抗原进行检测。结果自制TRFIA试剂与ELISA试剂对300例乙型肝炎患者血清标本中PreS1抗原的检测,TRFIA方法更灵敏,有9例标本ELISA方法结果为阴性,而用TRFIA方法可检测到PreS1抗原。对这9例标本进行HBV DNA定量检测,有6例标本HBV DNA拷贝数均106;高、中、低三个浓度,TRFIA方法批内和批间精密度测试,CV均小于10%;TRFIA方法从低值到高值,从批内至批间CV均优于ELISA方法;对于强阳性标本,从原倍到1∶16倍稀释,ELISA方法都无法区分阳性程度的强弱,而TRFIA方法结果从高到低有显著性区别。对于弱阳性标本用ELISA方法检测不到时,TRFIA方法仍可检出,一强阳性标本,ELISA方法在1∶8192倍稀释时结果为阴性,而TRFIA方法在1∶16384倍稀释时仍可检出PreS1抗原。结论TRFIA方法与ELISA方法相比,测量范围、精密度和灵敏度有较大提高。

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