副溶血性弧菌溶血相关毒素基因原核融合表达载体的构建

作     者：苏建新 聂军 苏桂栋 李兴国 李志峰 

作者机构：广州军区军事医学研究所流行病研究室广州510507 第一军医大学流行病教研室 第一军医大学附属南方医院 

出 版 物：《华南国防医学杂志》 (Military Medical Journal of South China)

年 卷 期：2003年第17卷第5期

页      面：1-3页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：广东省卫生厅医学科研课题(A2000347) 

主　　题：副溶血弧菌 溶血相关毒素 大肠杆菌 克隆 表达 

摘      要：目的:实现副溶血性弧菌溶血相关毒素TRH基因在大肠杆菌中的融合表达,以获得纯度较高的蛋白产物。方法:构建trh基因的原核融合表达系统PRⅡ(trh/pGEX—3X/DE3),并在31℃条件下,用0.6mmol/L IPTG诱导表达。用SDS-PAGE分析蛋白表达。结果:PRⅡ在上述条件下诱导后,目的蛋白呈高效、可溶、融合性表达。薄层扫描显示,细菌的周质腔中的蛋白量最高,SDS-PAGE表明,融合蛋白的相对分子量(Mr)为49Kda,与预期结果一致。结论:trh基因在原核融合表达系统pGEX-3X/DE3中获得成功表达,为基因工程大规模制备高纯度TRH抗原、构建基因工程菌苗、阐明该菌的致病机制奠定了基础。