小鼠心室肌细胞分离方法的改进

作     者：徐明 周士胜 李龙天 迟庆 Xu Ming;Zhou Shi-sheng;Li Long-tian;Chi Qing

作者机构：解放军第四军医大学生理学教研室 大连大学医学院医学研究中心辽宁省大连市116622 大连大学医学院医学研究中心 新乡医学院生理学教研室河南省新乡市453003 

出 版 物：《中国临床康复》 (Chinese Journal of Clinical Rehabilitation)

年 卷 期：2006年第10卷第16期

页      面：112-113,F0003页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

主　　题：心肌细胞/细胞学 细胞分离 膜片钳术 

摘      要：目的:探索更简单实用和重复性好的小鼠心肌细胞分离技术。方法:实验于2005-05/09在大连大学医学院医学研究中心完成。选择8～16周龄昆明小鼠150只,雌雄不拘,体质量30～40g,由大连大学医学院动物中心提供。采用原位主动脉插管和动脉夹固定法酶解分离小鼠心室肌细胞,并在室温下进行全细胞膜片钳记录。结果:可将主动脉插管的时间控制在1.5min内,所获心室肌细胞横纹清晰,一次性复钙可获得50%～60%的耐钙细胞,分离所得细胞可在全细胞膜片钳方式下记录到一过性外向钾电流(Ito)。结论:原位主动脉插管和动脉夹固定酶解分离心室肌细胞的方法简便易行,重复性好,克服了原有方法体外心脏插管时间长,每次插管时间差异较大,分离效果不稳定的弊端。