拟多形假丝酵母的双营养缺陷型工程化改造及鉴定

作     者：梁宇 靳玉琴 张靖 陈实 李启明 LIANG Yu;JIN Yu-qin;ZHANG Jing;CHEN Shi;LI Qi-ming

作者机构：北京生物制品研究所第六研究室100024 

出 版 物：《中华微生物学和免疫学杂志》 (Chinese Journal of Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2012年第32卷第11期

页      面：961-966页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：“863计划”重大专项(2012AA02A400) 北京市科委科技支撑项目(Z101102052410001) 

主　　题：拟多形假丝酵母菌 营养缺陷型 ura3基因 leu2基因 

摘      要：目的以拟多形假丝酵母菌（ATCC26012）为材料，构建遗传稳定性良好的尿嘧啶和亮氨酸双营养缺陷型工程化菌株。方法利用物化及基因工程等方法对拟多形假丝酵母菌株的染色体进行改造，将ura3基因和leu2基因进行定向诱变，以获得尿嘧啶和亮氨酸双营养缺陷型突变菌株，并对其进行生物学鉴定，包括菌株的遗传稳定性、基因序列及生理生化特征分析等。结果筛选得到尿嘧啶和亮氨酸双营养缺陷型突变菌株，鉴定结果显示该菌株遗传稳定性良好，标志基因均发生定向改变，生理生化结果显示该菌株能利用多种碳源和氮源，且生长状况良好。结论拟多形假丝酵母的双营养缺陷型工程化改造为进一步研究该菌株的遗传学奠定了基础，为多价蛋白组成类病毒颗粒的外源表达提供了工程化宿主。进而，为复杂疫苗抗原的重组表达和功能研究提供了技术手段。