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糖尿病环境下成骨细胞KDM6B表达的变化

Study on the Expression of KDM6B of Osteoblast in Diabetic Environment

作     者:唐宇 胡赟 罗丹 丁晓倩 李彩玉 郑雷蕾 TANG Yu;HU Yun;LUO Dan;DING Xiao-qian;LI Cai-yu;ZHENG Lei-lei

作者机构:重庆医科大学附属口腔医院重庆401145 口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室重庆401145 重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室重庆401145 

出 版 物:《四川大学学报(医学版)》 (Journal of Sichuan University(Medical Sciences))

年 卷 期:2019年第50卷第5期

页      面:660-665页

核心收录:

学科分类:1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含:心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基  金:国家自然科学基金(No.81470772) 重庆市科卫联合医学科研重点项目(No.2018ZDXM020) 重庆市自然科学基金(No.cstc2016jcyjA0238) 2016年重庆高校创新团队建设计划(No.CXTDG201602006)资助 

主  题:糖尿病 成骨细胞 表观遗传 KDM6B 

摘      要:目的研究糖尿病环境下骨髓间充质干细胞(BMSCs)的成骨分化能力及组蛋白去甲基化酶KDM6B表达的变化情况。方法制备糖尿病大鼠模型,分离培养糖尿病模型大鼠及正常大鼠来源的BMSCs, BMSCs以高糖、晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation products,AGE)模拟糖尿病环境,即将BMSCs分为6组:糖尿病组(糖尿病大鼠来源)和正常组(正常对照大鼠来源),高糖组(含D-葡萄糖30 mmol/L)和正常组(含普通浓度的D-葡萄糖5.5 mmol/L作为高糖对照),AGE组(含AGE 300μg/mL)和牛血清白蛋白(BSA,作为AGE对照)组(含BSA 300μg/mL)。除糖尿病组BMSCs为糖尿病大鼠来源,其余BMSCs为正常对照大鼠来源。各组BMSCs分别成骨诱导7 d后,进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色,观察BMSCs的诱导骨向分化能力;以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组BMSCs的成骨相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、组蛋白去甲基化酶KDM6B mRNA的表达,以Western blot检测H3K27Me3蛋白的表达。结果糖尿病组、高糖组及AGE组BMSCs的ALP染色细胞数均少于其相应对照组(P0.05),Runx2、KDM6B mRNA表达也均低于其对照组(P0.05),而H3K27Me3蛋白表达均高于其对照组(P0.05)。结论糖尿病环境下BMSCs成骨分化能力减弱,且Runx2 mRNA表达受到抑制,可能与KDM6B的表达抑制后H3K27Me3表达增加有关。

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