2mol/L尿素溶血试验在UT-B基因敲除小鼠核型鉴定中的应用

作     者：赵华山 李志满 吕斌 郭丽荣 梁爽 陈燕 孟艳 杨宝学 赵雪俭 

作者机构：吉林大学基础医学院病理生理学教研室暨吉林大学前列腺疾病防治研究中心吉林长春130021 吉林大学实验动物中心 吉林大学第一临床医院肾病科 

出 版 物：《中国实验诊断学》 (Chinese Journal of Laboratory Diagnosis)

年 卷 期：2007年第11卷第11期

页      面：1425-1428页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金(批准号:30670852) 

主　　题：UT-B 基因敲除 小鼠 尿素 溶血试验 

摘      要：目的探讨2 mol/L尿素溶血试验在UT-B基因敲除小鼠核型鉴定中的作用。方法(1)按SP级动物饲养标准进行饲养和繁殖;以UT-B基因敲除纯合子(UT-B-/-)成年雄鼠与C57/bl雌鼠合笼,繁殖出UT-B基因敲除杂合型小鼠(UT-B+/-,F1代),F1代UT-B+/-雄、雌鼠交配获F2代小鼠。(2)取F2代小鼠剪尾提取基因组DNA进行核型鉴定筛选纯合子小鼠(UT-B-/-)和野生型小鼠(UT-B+/+);(3)应用2 mol/L尿素溶血试验和肾脏RT-PCR进行UT-B-/-(JKnull)表型鉴定。结果(1)在SP级饲养和繁殖的条件下,已获得足够的UT-B-/-和UT-B+/+小鼠;(2)2 mol/L尿素溶血试验证明,UT-B+/+小鼠和UT-B+/-小鼠的红细胞加入到2 mol/L尿素中立刻溶血,UT-B-/-小鼠的红细胞10 min内不溶显示溶血抵抗。结论2 mol/L尿素溶血试验可准确地鉴定出UT-B-/-小鼠,与基因组DNA的PCR鉴定方法联合应用,可以使引进的UT-B-/-小鼠稳定繁殖、传代。