血栓性疾病个体化用药指导基因芯片试剂盒的制备和效果评价

作     者：袁语泽 马明星 王国强 关雪娃 王紫嫣 郭英俏 郑敬彤 章宏 陈光 王放 YUAN Yuze;MA Mingxing;WANG Guoqiang;GUAN Xuewa;WANG Ziyan;GUO Yingqiao;ZHENG Jingtong;ZHANG Hong;CHEN Guang;WANG Fang

作者机构：吉林大学基础医学院病原生物学教研室吉林长春130021 吉林寰基生物科技有限公司吉林长春130012 吉林大学基础医学院遗传学教研室吉林长春130021 吉林大学基础医学院生理学教研室吉林长春130021 吉林大学第一医院血管外科吉林长春130021 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2019年第45卷第6期

页      面：1267-1274,I0017页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：吉林省发改委产业创新专项资金项目资助课题(2016C050-3) 吉林省发改委产业技术研究与开发项目资助课题(2017c058-1) 吉林省科技厅中药办科技成果转化计划项目资助课题(20170311040YY) 

主　　题：血栓性疾病 基因芯片 氯吡格雷 华法林 

摘      要：目的:探讨血栓性疾病(TD)个体化用药指导基因芯片的制备过程,阐明一种快速、高通量检测氯吡格雷和华法林药物代谢基因的方法。方法:根据氯吡格雷药物代谢基因位点(CYP3A4、CYP2C19*17、CYP2C19*2和CYP2C19*3)和华法林药物代谢基因位点(CYP4F2*3、GGCX、VKORC1-2、VKORC1-1、CYP2C9*2和CYP2C9*3)设计相应的探针和引物,制备TD个体化用药指导的基因芯片检测试剂盒。经过DNA提取、PCR扩增、杂交、洗脱和扫描等步骤对基因芯片的灵敏性、重复性和稳定性进行评价。收集3个地区的150例TD受试者样本并进行药物代谢基因检测,以受试者在临床中接受的用药指导及6个月后患者的疾病恢复情况为依据,评价基因芯片试剂盒的有效率。结果:基因芯片检测2种药物的代谢基因均出现良好的杂交信号;芯片检测PCR扩增产物的最低检测浓度为103 copies·mL-1;对不同批次的3张芯片及同一批次的10张芯片进行平行测定,符合率为100%;芯片具有稳定性,有效期长达6个月;来源于3个地区的150例TD样本验证基因芯片检测试剂盒的有效率在90%以上。结论:成功制备了高通量检测氯吡格雷和华法林药物代谢基因的TD个体化用药指导基因芯片试剂盒,该方法灵敏度高,重复性好,稳定性强,制备效果优良。