缺氧环境对宫颈腺癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制

作     者：刘艳 李月洁 黄小环 龚莉 周铁军 LIU Yan;LI Yuejie;HUANG Xiaohuan;GONG Li;ZHOU Tiejun

作者机构：西南医科大学附属医院四川泸州646000 重庆三峡医药高等专科学校 

出 版 物：《山东医药》 (Shandong Medical Journal)

年 卷 期：2019年第59卷第31期

页      面：46-50页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：四川省科学技术与泸州市人民政府、泸州医学院联合科研专项资金计划项目(14JC01773-LH72) 泸州医学院附属医院科研课题计划[(2014)71-180] 

主　　题：宫颈腺癌 缺氧环境 缺氧诱导因子2α 血管内皮钙黏蛋白 细胞增殖 细胞迁移 

摘      要：目的探讨缺氧环境对宫颈腺癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制。方法将传3代、对数生长期、生长状态良好的宫颈腺癌HeLa细胞接种于96孔板,分别给予50、100、150、200、250μmol/L氯化钴(CoCl 2)干预,另设对照孔,不予CoCl 2干预。干预24、48、72 h,收集细胞,采用MTT法检测各孔细胞增殖抑制率。选取细胞增殖抑制率最低的CoCl 2浓度作为后续构建细胞缺氧模型的最佳浓度。将HeLa细胞接种于6孔板,随机分为观察组和对照组,观察组通过CoCl 2构建细胞缺氧模型,对照组常规培养,显微镜下观察继续培养0、48 h划痕距离,计算细胞迁移率。将HeLa细胞接种于6孔板,通过CoCl 2构建细胞缺氧模型,分别于CoCl 2干预0、24、48、72 h收集细胞,采用RT-PCR、Western blotting法检测缺氧诱导因子2α(HIF-2α)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)mRNA和蛋白表达。结果50、100μmol/L CoCl 2干预24 h能够促进HeLa细胞增殖(P均0.05),且以100μmol/L时效果更强,故后续选择100μmol/L CoCl 2构建细胞缺氧模型。150、200、250μmol/L CoCl 2干预24 h即可表现出对HeLa细胞增殖的抑制作用,且随着干预时间延长,细胞增殖抑制作用越来越明显(P均0.05)。观察组与对照组细胞迁移率分别为(61.4±4.8)%、(37.9±3.6)%,两组比较P0.01。缺氧环境下,HeLa细胞HIF-2α、VE-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均明显升高(P均0.05),但后者表达随着缺氧时间延长有所降低。Pearson直线相关分析显示,缺氧环境下HeLa细胞HIF-2α表达与VE-cadherin表达呈正相关关系(P均0.05)。结论一定程度缺氧能够促进宫颈腺癌细胞增殖和迁移能力,其机制可能与缺氧环境能够增强HIF-2α、VE-cadherin表达有关。