Livin shRNA慢病毒载体的成功构建及鉴定

作     者：李鸿茹 陈愉生 陈刚 林立芳 LI Hong-ru;CHEN Yu-sheng;CHEN Gang;LIN Li-fang

作者机构：福建医科大学省立临床医学院 福建省立医院呼吸科350001 福建省立医院内分泌科350001 福建省立医院福建省心血管病重点实验室350001 

出 版 物：《福建医药杂志》 (Fujian Medical Journal)

年 卷 期：2010年第32卷第1期

页      面：6-8页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：福建省自然科学基金资助项目(2008J0074) 

主　　题：慢病毒属 遗传载体 RNA干扰 基因表达 

摘      要：目的构建携带livin基因短片段发卡RNA(livin shRNA)的慢病毒载体。方法针对已经筛选确定的干扰人livin基因的有效靶序列,设计、合成靶序列的寡聚脱氧核苷酸DNA序列(Oligo DNA),退火形成双链DNA,与经Hpa I和Xho I酶切后的携带U6启动子和绿色荧光蛋白的pGCL-GFP载体连接产生短片段发卡RNA慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。结果PCR鉴定与DNA测序证实合成的含livin shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确。结论成功构建人livin shRNA慢病毒载体。