负载hTERT基因片段的DC肿瘤疫苗制备及其抗肿瘤作用的研究

作     者：崔晶 崔丽萍 孙青 CUI Jing;CUI Li-ping;SUN Qing

作者机构：山东省千佛山医院 山东大学附属千佛山医院病理科山东济南250014 山东省烟台市卫生学校病理教研室山东烟台264000 

出 版 物：《中华肿瘤防治杂志》 (Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment)

年 卷 期：2010年第17卷第16期

页      面：1257-1261页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：山东省科技发展计划基金(2004GG3202003) 

主　　题：hTERT 慢病毒载体 肿瘤疫苗 免疫化学 树突细胞 

摘      要：目的:研究负载hTERT基因片段的树突状细胞(DC)肿瘤疫苗及其抗肿瘤作用。方法:构建负载hTERT基因片段的慢病毒载体,采用细胞免疫化学技术检测Lenti-hTERT转导的293T细胞中hTERT基因的表达;分离制备脐血来源的DC,通过相差显微镜和流式细胞仪鉴定;Lenti-hTERT转导DC细胞制备DC疫苗;DC疫苗刺激同种T淋巴细胞诱导特异性CTL并用MTT法检测其增殖能力和对靶细胞的特异性杀伤能力。结果:成功构建负载hTERT基因片段的Lenti-hTERT,病毒滴度达5.88×106U/mL;转导后细胞中hTERT的表达显著升高,持续时间2个月;分离制备脐血来源的DC,经慢病毒转导成为负载hTERT的DC疫苗,负载了hTERT抗原的DC刺激淋巴细胞增殖的能力明显优于未负载hTERT的DC(P1.5。负载了hTERT抗原的DC诱导CTLT对HepG2肝癌细胞的杀伤能力明显高于未经修饰的DC所诱导CTLN(P0.05。结论:用慢病毒介导hTERT修饰制备的DC疫苗,其刺激T细胞增殖的能力增强,诱导的CTL对端粒酶阳性的HepG2肿瘤细胞具有特异而且显著增强的杀伤效应。