不同结合状态硫酸软骨素多糖链对体外二维三维培养背根节神经突起生长影响研究

作     者：彭谨 郑翔 李绍波 周雪 章为 PENG Jin;Zheng Xiang;Li Shao-bo;Zhou Xue;Zhang Wei

作者机构：四川大学华西基础医学院组织学胚胎学与神经生物学教研室610041 

出 版 物：《四川解剖学杂志》 (Sichuan Journal of Anatomy)

年 卷 期：2007年第15卷第1期

页      面：5-9页

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 10[医学] 

主　　题：背根节 三维培养 硫酸软骨素1,1-羰基二咪唑(CDI) 

摘      要：目的构建鸡胚背根节细胞3D生长模型，观察CSPG对不同浓度的琼脂糖水溶胶培养基对鸡胚背根节神经突起生长的影响。方法①利用多肽缩合剂1’1羰基二咪唑介导CS-B长链与琼脂糖凝胶共价结合。②分别配制0．5％、0．75％、1％、1．25％、1．5％的SeaPrep琼脂糖凝胶溶液和共价结合了CS-B多糖长链的琼脂糖凝胶溶液。取孵育9～10天后鸡胚背根节加入上述凝胶溶液加培养液培养。③培养24小时之后在24h、48h、72h、96h进行观察拍照。观察各时间点神经突起生长情况。结果①鸡胚背根节神经突起在1．25％的琼脂糖凝胶溶液中开始呈3D生长，在小于1％的琼脂糖溶液中只能2D生长。②在同一时间点，呈2D生长的背根节突起和呈3D生长的背根节突起在突起长度方面没有统计学差异（P〉0．05）。③3D生长的DRG神经突起在共价结合了CS-B的琼脂糖凝胶中生长长度明显短于普通琼脂糖水凝胶（P〈0．05），并且可观察到部分突起长出短而直的成束突起。但是对于呈2D生长的DRG突起长度在两种培养基中却未见差异（P〉0．05）。结论鸡胚背根节神经元周围突起生长长度在3D培养中与在2D培养中有没有明显的差异。硫酸软骨素能够有效抑制呈3D生长的神经节突起生长，并且影响到神经突起的生长方式。但是在2D培养基中，未能看到上述的抑制作用。