Zyxin基因真核表达载体的构建及检测

作     者：孙明明 戴国俊 孙大辉 林雨鑫 张跟喜 谢恺舟 张佳琦 张敏宇 施会强 王金玉 

作者机构：扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009 江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏京海禽业集团有限公司江苏海门226103 

出 版 物：《江苏农业学报》 (Jiangsu Journal of Agricultural Sciences)

年 卷 期：2013年第29卷第4期

页      面：822-825页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家及江苏省大学生实践创新训练项目(201211117035 2012JSSPITP1347) 国家肉鸡产业技术体系项目(NYCTX-42-G1-05) 江苏省高校自然科学研究重大项目(11KJA230001) 江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD) 

主　　题：Zyxin 基因 真核载体 表达 

摘      要：为了研究联蛋白基因(Zyxin)功能,对Zyxin基因进行了真核表达载体的构建,并对其进行鉴定。用全基因合成的方法得到Zyxin目的基因,将目的基因与pEX-6载体分别进行酶切,然后进行连接,连接产物转化到感受态大肠杆菌。挑取克隆,经质粒DNA抽提和酶切,琼脂糖凝胶电泳和测序,对克隆片段进行鉴定。将重组质粒pEX-6-Zyxin瞬时转染293T细胞。结果显示:电泳、双酶切和测序结果与预期结果相符。转染48 h后观察到红色荧光,用实时荧光定量PCR检测转染后48 h和72 h Zyxin基因mRNA水平有较高表达。表明成功构建了鸡Zyxin真核表达载体,为进一步研究该基因功能奠定了基础。