内皮祖细胞对BU／CY预处理小鼠骨髓移植后免疫重建的促进作用

作     者：刘迷迷 房婷 化静 付金玉 黄玉金 吴进燕 徐开林 曾令宇 LIU Mi-mi;FANG Ting;HUA Jing;FU Jin-yu;HUANG Yu-jin;WU Jin-yan;XU Kai-lin;ZENG Ling-yu

作者机构：徐州医学院移植免疫实验室徐州医学院附属医院血液科江苏徐州221002 

出 版 物：《国际输血及血液学杂志》 (International Journal of Blood Transfusion and Hematology)

年 卷 期：2013年第36卷第1期

页      面：1-6页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81070446) 

主　　题：骨髓移植 内皮祖细胞 免疫重建 修复 

摘      要：目的探讨异基因骨髓移植中联合内皮祖细胞（EPC）移植对接受白消安／环磷酰胺（Bu／CY）方案预处理小鼠移植后免疫重建的影响。方法选择周龄为8～10周龄，体重为（22～24）g的健康SPF级雄性BALB／c小鼠58只作为研究对象。随机分为正常对照组（n=9）：经尾静脉注射磷酸盐缓冲液（PBS）0．2mL；BU／CY预处理组（n=9）：移植前7d至前2d接受Bu／CY方案预处理后，经尾静脉注射PBS0．2mL；单纯骨髓细胞移植组（BMT组）（n=20）：BU／CY方案预处理后，经尾静脉注射供者骨髓细胞；EPC联合移植组（EPC组）（n=20）：BU／CY方案预处理后，经尾静脉注射供者骨髓细胞及EPC。于移植后第14，21，28天，采用流式细胞术检测各组小鼠骨髓中B系祖（ProB）细胞（CD19＋c-kit＋IgM-）数量、胸腺中CD4＋，CD8＋，双阳性（DP）及双阴性（DN）T淋巴细胞比例及脾脏中CD4＋，CD8＋T淋巴细胞及B淋巴细胞比例，并通过苏木素-伊红染色及免疫组化染色观察中枢和外周免疫器官组织结构的恢复及损伤血管内皮的修复情况。结果移植后BMT及EPC组小鼠骨髓中ProB细胞数量持续增高，第14天时，EPC组（0．83×10^6）显著高于BMT组（0．14×10^6）（χ2=7．2，P〈0．05）；胸腺中DP细胞比例于第21天达峰值，EPC组（0．58％）较BMT组（0．39％）显著增高（χ2=6．49，P〈0．05）；脾脏中CD4＋T细胞比例持续增高，第28天时，EPC组（3．64％）较BMT组（2．47％）显著增高（χ2=7．2，P〈0．05）；CD8＋T细胞比例在移植后第21天达峰值，EPC组（3．64％）较BMT组（3．21%）显著增高（χ2=5．42，P〈0．05）。组织病理学检查也显示EPC组小鼠的中枢及外周免疫器官组织结构恢复较BMT组快，组织中实质细胞数量恢复较BMT组快；对脾脏血窦内皮免疫组化染色的结果也显示，EPC组小鼠脾血窦内皮完整性的恢复较BMT组快。结论BU／CY预处理小鼠异基因骨髓移植中，联合EPC输注可促进移植受鼠免疫器官损伤血管内皮的修复、促进其组织结构的恢复，从而有效促进移植后的免疫重建。